Skip to main page content
U.S. flag

An official website of the United States government

Dot gov

The .gov means it’s official.
Federal government websites often end in .gov or .mil. Before sharing sensitive information, make sure you’re on a federal government site.

Https

The site is secure.
The https:// ensures that you are connecting to the official website and that any information you provide is encrypted and transmitted securely.

Access keys NCBI Homepage MyNCBI Homepage Main Content Main Navigation
. 2018 Dec;29(6):496-e167.
doi: 10.1111/vde.12686. Epub 2018 Sep 3.

An evaluation of veterinary allergen extract content and resultant canine intradermal threshold concentrations

Stephanie B Abrams  1 , Guy N Brock  2 , Marilly Palettas  2 , Michelle L Bolner  3 , Tricia Moore-Sowers  3 , Greg A Plunkett  3 , Lynette K Cole  1 , Sandra F Diaz  1 , Gwendolen Lorch  1
Affiliations

An evaluation of veterinary allergen extract content and resultant canine intradermal threshold concentrations

Stephanie B Abrams et al. Vet Dermatol. 2018 Dec.

Abstract
in English, French, Spanish, German, Old Japanese, Chinese, Portuguese

Background: Limited information is available for dogs on threshold concentrations (TCs), and the protein composition of common allergenic extracts produced by different manufacturers.

Hypothesis/objectives: To characterize the protein heterogeneity of tree, grass, weed and mite allergens from different lots of allergenic extracts, and to determine intradermal TCs for healthy dogs using extracts from two manufacturers.

Animals: Twenty five privately owned, clinically healthy dogs and ten purpose-bred beagle dogs.

Methods and materials: Protein concentration and heterogeneity of 11 allergens from two manufacturers were evaluated using a Bradford-style assay and SDS-PAGE. Intradermal testing was performed with 11 allergens from each company at four dilutions. Immediate reactions were subjectively scored (0 to 4+), and objectively measured (mm) and their percentage concordance evaluated. Model-based TCs were determined by fitting positive reactions (≥2+) at 15 min to generalized estimating equations.

Results: Allergen extract protein quantity and composition varied within and between manufacturers despite sharing the same PNU/mL values. Model-based TCs of one weed, five trees, two grasses and a house dust mite were determined for extracts from Manufacturer 1 (M1), and for extracts of three weeds, three trees and two grasses from Manufacturer 2 (M2). Receiver operating characteristic curve analyses determined a percentage concordance of the objective and subjective measurements of 77.3% for M1 and 75% for M2 allergens.

Conclusions and clinical importance: Veterinary allergen extracts labelled as the same species and PNU/mL are not standardized; they show heterogeneity in composition and potency within and between manufacturers. Variability in extract content may require adjustment of intradermal testing concentrations.

Contexte –: On en sait peu chez le chien sur les concentrations seuils (TCs) et la composition protéique des extraits allergéniques produits par les différents fabricants.

Hypothéses/Objectifs –: Déterminer l’hétérogénéité proteique d’allergènes d’arbre, de graminées, d’herbacées et d’acariens pour des lots différents et de d eterminer les TCs intradermiques pour les chiens sains á l’aide d’extraits de deux fabricants.

Sujets –: Vingt cinq chiens de propriétaires cliniquement sains et dix beagles d’élevage.

Matériel et méthode –: La concentration protéique et l’hétérogénéit e de 11 allergénes de deux fabricants ont été évaluées par un test de Bradford et SDS-PAGE. Les tests intradermiques ont été réalisés avec 11 allergènes de chaque fabricant à quatre dilutions. Les réactions immediates ont été notées subjectivement (0 á 4+) et mesurees objectivement (mm) et leu pourcentage de concordance évalué. Les TCs bas ees sur modele ont été déterminées par réactions positives (≥2±)á des equations estimees généralisées.

Resultats –: La quantité et la composition protéique des extraits allergéniques variaient au sein et entre les fabricants malgré le partage des mȇmes valeurs de PNU/mL. Les TCs basées sur modéle d’une graminée, cinq arbres, deux herbacees et un acarien de poussiére de maison ont été déterminés pour les extraits de fabricant 1 (M1) et pour les extraits de trois graminées, trois arbres et deux herbacées pour le fabricant 2 (M2). Les analyses de courbe caractéristique ont détermines un pourcentage de concordance des mesures objectives et subjectives de 77.3% pour les allergénes de M1 et 75% pour M2.

Conclusions et importance clinique –: Les extraits allergéniques vétérinaires étiquetés comme les mȇmes espéces et PNU/mL ne sont pas standardisés; ils montrent une hétérogénéit e de composition et de puissance au sein et entre les fabricants. La variabilité des contenus d’extraits peut nécessiter des ajustements des concentrations des tests intradermiques.

Introducción –: en perros hay informacion limitada acerca de concentraciones umbral (TC) y la composición proteica de extractos alergénicos comunes producidos por diferentes fabricantes.

Hipótesis/Objetivos –: caracterizar la heterogeneidad proteica de alergenos de árboles, hierbas, maleza y ácaros de diferentes lotes de extractos alergénicos y determinar TC intradérmicas para perros sanos utilizando extractos de dos fabricantes.

Animales –: veinticinco perros de propietarios particulares, clınicamente sanos y diez perros Beagle criados con este proposito.

Metodos y materiales –: la concentración de protéınas y la heterogeneidad de 11 alergenos de dos fabricantes se evaluaron mediante un ensayo de estilo Bradford y SDS-PAGE. La prueba intradérmica se realizó con 11 alérgenos de cada compaῆía en cuatro diluciones. Las reacciones inmediatas se puntuaron subjetivamente (0 a 4+) y se midieron objetivamente (mm) y se evaluó su porcentaje de concordancia. Los TC se determinaron segun modelos ajustando las reacciones positivas ( ≥2+) a los 15 minutos a ecuaciones de estimación generalizadas.

Resultados –: la cantidad y la composicion de las proteĺnas del extracto de alérgenos variaron en el mismo fabricante y entre los fabricantes a pesar de compartir los mismos valores de PNU/ml. Se determinaron las TC basadas en modelos de una mala hierba, cinco árboles, dos gramĺneas y un acaro del polvo domestico para extractos del Fabricante 1 (M1) y para extractos de tres malas hierbas, tres árboles y dos gramıneas del Fabricante 2 (M2). Los análisis de la curva caracterıstica operativa del receptor determinaron una concordancia porcentual de las mediciones objetivas y subjetivas de 77,3% para M1 y 75% para alergenos M2.

Conclusiones e importancia clınica –: los extractos alergénicos veterinarios etiquetados como la misma especie y PNU/mL no están estandarizados; muestran heterogeneidad en la composición y la potencia en el mismo fabricante y entre los fabricantes. La variabilidad en el contenido del extracto puede requerir el ajuste de las concentraciones de prueba intradérmicas.

Hintergrund –: Es gibt nur limitierte Information ὒber die Schwellenkonzentrationen (TCs) und die Protein-zusammensetzung von häufigen Allergenextrakten fὒr Hunde, die von verschiedenen Herstellern produziert werden.

Hypothese/Ziele –: Eine Charakterisierung der Heterogenität von Proteinen von Baum-, Gras-, Unkrautund Milbenallergenen aus unterschiedlichen Chargen von Allergenextrakten und die Bestimmung der intradermalen TCs fὒr gesunden Hunde bei Verwendung von Extrakten von zwei Herstellern.

Tiere –: Fὒnfundzwanzig klinisch gesunde Hunde in Privatbesitz und zehn Zweck-gezὒchtete Beagles.

Methoden und Material –: Die Proteinkonzentrationen und die Heterogenität von 11 Allergenen von zwei Herstellern wurden mittels Bradford-Style-Assay und SDS-PAGE untersucht. Es wurde mit 11 Allergenen eines jeden Herstellers ein Intradermaltest in vier Verdunnungen durchgef€ uhrt. Die Sofortreaktionen wurden subjektiv bewertet (0 bis 4+) und objektiv gemessen (mm) und ihre prozentuelle Ubereinstimmung evaluiert. Es wurden Modell-basierte TCs bestimmt, wobei positive Reaktionen (≥2+) nach 15 Minuten generalisierten geschätzten Gleichungen angepasst wurden.

Ergebnisse –: Die Quantität des Allergenextraktionsproteins und seine Zusammensetzung variierte innerhalb und zwischen den Herstellern, obwohl sie dieselben PNU/mL Werte zeigten. Modell-basierte TCs eines Unkrauts, von fὒnf Bäumen, zwei Gräsern und einer Hausstaubmilbe wurden fur die Extrakte von Hersteller 1 (M1) und fὒr die Extrakte von drei Unkräutern, drei Bäumen und zwei Gräsern von Hersteller 2 (M2) bestimmt. Die Analyse mittels Receiver-Operating-Characteristic-Kurve bestimmte eine prozentuelle ὒbereinstimmung der objektiven und subjektiven Messungen von 77,3% f€ur M1 und 75% fὒr M2 Allergene.

Schlussfolgerungen und klinische Bedeutung –: Veterinärmedizinische Allergenextrakte, die derselben Spezies und PNU/mL entsprechen sind nicht standardisiert; sie zeigen eine Heterogenitat in ihrer Zusammensetzung und Stärke innerhalb und zwischen den Herstellern. Die Variabilität in der Zusammensetzung des Extraktes konnte eine Anpassung der verwendeten Konzentrationen beim Intradermaltest nÖtig machen.

背景 –: 異なるメーカーで製造された共通のアレルゲン抽出物のタンパク組成および犬における閾値濃度 (TC)について、利用できる情報は限られている。

仮説/目的 –: 本研究の目的は、2つのメーカーの抽出物を使用してアレルゲン抽出物の異なるロットからの樹木、草、雑草およびダニアレルゲンのタンパク質の不均一性を特徴づけること、および健康な犬の皮内TCを決定することである。

被験動物 –: 飼育下にある臨床的に健康な犬25頭と研究目的に飼育されたビーグル犬10頭。

方法および材料 –: 2つの製造業者から11種類のアレルゲンのタンパク濃度および不均一性をBradford-style assayおよびSDS-PAGEを用いて評価した。皮内試験は各会社の11種類のアレルゲンを用いて4回希釈で実施した。即時反応を主観的に採点(0〜4+)、客観的に測定(mm)し、それらの比率の一致度を評価した。閾値濃度(TC)のモデルベースは、一般化された推定式に対し15分の陽性反応(≧2 +)を適合し決定した。

結果 –: アレルゲン抽出物のタンパク量および組成は、同じPNU/mL値を共有しているにもかかわらず、製造業者内および製造業者間で変化した。製造者1(M1)の抽出物から1つの雑草、5つの樹木、2つの草およびダストダニを、製造者2(M2)の抽出物から3つの雑草、3つの樹木および2つの草の閾値濃度(TC)のモデルベースを決定した。M1の77.3%およびM2アレルゲンの75%の客観的および主観的測定値の比率の一致度を受信者動作特性曲線解析により判定した。

結論と臨床的重要性 –: 同種およびPNU/mLと表示した獣医療アレルゲン抽出物は標準化されていない。それは製造者内および製造者間において組成および効力に不均一性を示すからである。抽出物含有量の変 動は、皮内試験濃度の調整を必要とする可能性がある。

背景 –: 对于犬的阈值浓度(TCs),以及由不同制造商生产的常见过敏性提取物的蛋白质组成,可获得的信息很有限。

假设/目的 –: 对不同树木、草、杂草和螨虫过敏原提取物,描述其蛋白质差异性特征,并使用两家不同制造商生产的提取物,测定健康犬的皮内TCs。

动物 –: 临床检查健康的二十五只私家犬,以及十只繁殖用比格犬

材料和方法 –: 使用Bradford方法和SDS-PAGE,评估来自两家制造商的11种过敏原的蛋白质浓度和异质性,皮内试验选用两家公司的11种过敏原,分别四倍稀释。对快速反应进行主观评分(0至4+)、客观测量(mm),并评估其百分比一致性,将15分钟时阳性反应(≥2+)拟合到广义估计方程,来确定基于模型的TCs。

结果 –: 尽管具有相同的PNU / mL值,但过敏原提取物蛋白质的量和组成,在制造商内部和两家之间存在差异。选自制造商1(M1)的一种杂草、五种树、两种草和屋尘螨的提取物,以及来自制造商2(M2)的三种杂草, 三种树和两种草的提取物,确定其基于模型的TCs。观测者操作特性曲线分析并确定了客观和主观测量的百分比一致性,M1符合率为77.3%,M2为75%。

结论和临床价值 –: 标签上种类和PNU/mL相同的兽医临床过敏原提取物仍未标准化; 他们显示了制造商内部和制造商之间产品成分和效力的差异性;这种提取物含量的变化,可能需要调整皮内测试浓度。

Contexto –: Poucas informacoes estão disponíveis para cães sobre os limiares irritativos (LIs), e sobre a composição proteica de extratos alergênicos comuns produzidos por diferentes fabricantes.

Hipótese/Objetivos –: Caracterizar a heterogeneidade proteica de alérgenos de árvores, gramíneas, herbáceas e ácaros de diferentes lotes de extratos alergênicos, e determinar os LIs intradêrmicos para cães saudáveis utilizando extratos de dois fabricantes.

Animais –: Vinte e cinco cães de proprietários, clinicamente saudáveis e dez cães beagles de laboratório criados para este propósito.

Métodos e materiais –: A concentração proteica e a heterogeneidade de 11 alérgenos de dois fabricantes foram avaliados utilizando um ensaio tipo Bradford e SDS-PAGE. Os testes intradérmicos foram realizados com 11 alérgenos de cada fabricante em quatro diluições. As reacões imediatas foram avaliadas subjetivamente (0 a 4+), e mensuradas (mm) objetivamente e avaliou-se também a sua porcentagem de concordância. Os LIs baseados em modelo foram determinados encaixando-se as reações positivas (≥2+) dentro de 15 minutos em equações estimativas generalizadas.

Resultados –: A quantidade de proteínas e a composicão dos extratos alergênicos variou nas amostras dô mesmo fabricante e entre fabricantes, ainda que apresentassem os mesmos valores de PNU/mL. Os LIs baseados em modelo para uma herbácea, cinco árvores, duas gramíneas e um ácaro da poeira doméstica foram determinados para extratos do Fabricante 1 (F1), e para extratos de três herbáceas, três árvores e duas gramíneas do Fabricante 2 (F2). As análises da curva característica operacional do receptor determinaram uma porcentagem de concordância de 77,3% entre as mensurações objetivas e subjetivas para os alérgenos de M1 e de 75% para os de M2.

Conclusões e importância clínica –: Os extratos alergênicos veterinários registrados como sendo da mesma espécie e concentração em PNU/mL não são padronizados; eles demonstram heterogeneidade na sua composição e potencia dentro das amostras do mesmo fabricante e entre fabricantes. A variabilidade na composição dos extratos pode demandar ajustes nas concentrações dos testes intradérmicos.

PubMed Disclaimer

Conflict of interest statement

Conflict of interests: Michelle L. Bolner, Tricia Moore-Sowers and Greg A. Plunkett are employees of ALK-Abello, they were involved in study design and drafting of the manuscript; the other authors do not declare any conflict of interests.

Figures

Figure 1.
Figure 1.
SDS-PAGE analysis (a) Phleum pretense (Timothy grass) and (b) Sorghum halepense (Johnson grass). Protein concentration of Phleum pretense extracts were 10,000 PNU per lane and the protein content of Sorghum halepense extracts were evaluated at 20,000 PNU per lane. (a) Lanes: (1) Ladder; (2) Greer® Timothy grass Lot #278062; (3) Greer® Timothy grass Lot #288475; (4) ALK-Abelló Timothy grass mix; (5) ALK-Abelló Timothy grass Lot #1701311; (6) Timothy grass Lot #1817751. (b) Lanes: (1) Ladder; (2) Greer Johnson grass, Lot #277588; (3) Greer Johnson grass, Lot #287540; (4) ALK-Abelló Johnson grass mix; (5) ALK-Abelló Johnson Lot #1475181; (6) ALK-Abelló Johnson Lot #1815590; (7) ALK-Abelló Johnson Lot #1512897. Mixed allergens were composed of at least two allergen extracts of different lots from the respective manufacturer.
Figure 2.
Figure 2.
Receiver operating curves (ROC) for percentage concordance of intradermal test subjectively positive reactions (≥2+) and objective measurements (mm). (a) The area under the curve (AUC) when combining results from both manufacturers. (b) The AUCs for ALK-Abelló (blue) and for Greer (red). The black diagonal line (random) extending from coordinates 0,0 to 1,1 represents the benchmark for matching a subjective result with a larger objective measurement based on random chance alone.
See this image and copyright information in PMC

Similar articles

See all similar articles

Cited by

References

    1. DeBoer DJ, Hillier A. The ACVD task force on canine atopic dermatitis (XV): fundamental concepts in clinical diagnosis. Vet Immunol Immunopathol 2001; 81: 271–276. - PubMed
    1. DeBoer DJ, Hillier A. The ACVD task force on canine atopic dermatitis (XVI): laboratory evaluation of dogs with atopic dermatitis with serum-based “allergy” tests. Vet Immunol Immunopathol 2001; 81: 277–287. - PubMed
    1. Hillier A, DeBoer DJ. The ACVD task force on canine atopic dermatitis (XVII): intradermal testing. Vet Immunol Immunopathol 2001; 81: 289–304. - PubMed
    1. Alessandri C, Ferrara R, Bernardi ML et al. Diagnosing allergicsensitizations in the third millennium: why clinicians should know allergen molecule structures. Clin Transl Allergy 2017; 7: 21. - PMC - PubMed
    1. Aalberse RC, Aalberse JA. Molecular allergen-specific IgE assays as a complement to allergen extract-based sensitization assessment. J Allergy Clin Immunol Pract 2015; 3: 863–869. - PubMed

Associated data