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. 2025 Dec;66(6):738-746.
doi: 10.1002/uog.70015. Epub 2025 Sep 6.

Performance of non-invasive prenatal testing in vanishing-twin and multiple pregnancies: results of TRIDENT-2 study

J C A van Eekhout  1 , C J Bax  2 , L van Prooyen Schuurman  1 , E C Becking  3 , A J E M van der Ven  4 , D Van Opstal  1 , E M J Boon  5 , M V E Macville  6 , M N Bekker  3 , R J H Galjaard  1 ; Dutch NIPT Consortium
Collaborators, Affiliations

Performance of non-invasive prenatal testing in vanishing-twin and multiple pregnancies: results of TRIDENT-2 study

J C A van Eekhout et al. Ultrasound Obstet Gynecol. 2025 Dec.

Abstract
in English, Spanish, Chinese

Objective: To evaluate the performance of non-invasive prenatal testing (NIPT) in vanishing-twin and multiple pregnancies.

Methods: This study was conducted as part of the TRIDENT-2 study, in which NIPT was offered as a first-tier screening test to women with a multiple pregnancy or vanishing-twin pregnancy between 1 June 2020 and 31 March 2023 in The Netherlands. Abnormal NIPT results were investigated by follow-up invasive prenatal testing and/or postnatal genetic testing. Chorionicity, amnionicity and type of vanishing twin were determined on first-trimester ultrasound examination. A vanishing twin was classified as Type I in the presence of an additional empty gestational sac or as Type II when an additional non-viable embryo was observed on ultrasound. The performance of NIPT (sensitivity, specificity and positive predictive value (PPV)) was assessed.

Results: NIPT was performed in 655 women with a vanishing-twin pregnancy, of which 231 were Type I, 374 were Type II and 50 were of unknown type. Women with a Type-II vanishing-twin pregnancy had a significantly higher likelihood of receiving an abnormal NIPT result compared to those with Type I (12.6% vs 1.7%; P < 0.001). Among the 655 vanishing twins, NIPT was indicative of trisomies 21, 18 and 13 in 17 cases (screen-positive rate (SPR), 2.60%), four cases (SPR, 0.61%) and eight cases (SPR, 1.22%), respectively. NIPT was indicative of additional findings (chromosomal aberrations other than the major trisomies) in 29 cases that underwent genome-wide NIPT (SPR, 6.16%). In 7/17 (41.2%) cases, trisomy 21 was confirmed in the remaining fetus by cytogenetic follow-up. The sensitivity of NIPT for the detection of trisomy 21 in vanishing-twin pregnancies was 100% (95% CI, 59.0-100%), the specificity was 98.5% (95% CI, 97.2-99.3%) and the PPV was 41.2% (95% CI, 18.4-67.1%). None of the cases of trisomy 18 (n = 4), trisomy 13 (n = 8) or with additional findings (n = 29) were confirmed in the remaining fetus. Of the 12 cases in which NIPT was performed after 15 weeks' gestation, there were no discordant-positive results. NIPT was performed in 2992 women with a dichorionic diamniotic twin pregnancy, 1112 women with a monochorionic twin pregnancy and 75 women with a triplet pregnancy. Of the 2992 dichorionic twin pregnancies, 27 NIPT results were indicative of trisomy 21, 18 or 13 (SPR, 0.90%), of which 21 were confirmed in one fetus. In addition, 16 NIPT results were indicative of an additional finding (SPR, 0.75%), of which three were confirmed by invasive prenatal testing. In 3/1112 (0.3%) monochorionic twin pregnancies, NIPT was indicative of trisomy 21, which was confirmed in both fetuses in all cases. In addition, NIPT was indicative of an additional finding in four cases (SPR, 0.49%), of which none were confirmed. Of the 75 triplet pregnancies, NIPT was indicative of trisomy 21 in one case (SPR, 1.33%); trisomy 21 was confirmed in one of the three triplet fetuses.

Conclusions: Women with a Type-II vanishing-twin pregnancy are more likely to receive an abnormal NIPT result compared to those with a Type-I vanishing-twin pregnancy. NIPT appears suitable for detecting trisomy 21 in the remaining fetus of a vanishing-twin pregnancy, however, none of the trisomy 18, trisomy 13 or additional findings could be confirmed on cytogenetic follow-up. There were no discordant-positive results reported when NIPT was conducted after 15 weeks' gestation. © 2025 The Author(s). Ultrasound in Obstetrics & Gynecology published by John Wiley & Sons Ltd on behalf of International Society of Ultrasound in Obstetrics and Gynecology.

Desempeño de la prueba prenatal no invasiva en embarazos múltiples y de gemelo desaparecido: resultados del estudio TRIDENT‐2 OBJETIVO: Evaluar el rendimiento de la prueba prenatal no invasiva (PPNI) en embarazos múltiples y de gemelo desaparecido (o evanescente). MÉTODOS: Este estudio se llevó a cabo como parte del estudio TRIDENT‐2, en el que se ofreció la PPNI como prueba de diagnóstico de primer nivel a mujeres con embarazo múltiple o con embarazo de gemelo desaparecido entre el 1 de junio de 2020 y el 31 de marzo de 2023 en los Países Bajos. Los resultados anómalos de la PPNI se investigaron mediante pruebas prenatales invasivas de seguimiento y/o pruebas genéticas postnatales. La corionicidad, la amnionicidad y el tipo de gemelo evanescente se determinaron en el examen ecográfico del primer trimestre. Un gemelo desaparecido se clasificó como Tipo I si había presencia de un saco gestacional vacío adicional o como Tipo II cuando en la ecografía se observó un embrión adicional no viable. Se evaluó el rendimiento de la PPNI (sensibilidad, especificidad y el valor predictivo positivo (VPP)). RESULTADOS: Se realizó una PPNI en 655 mujeres con un embarazo de gemelo desaparecido, de las cuales 231 eran de Tipo I, 374 de Tipo II y 50 de tipo desconocido. Las mujeres con un embarazo de gemelo desaparecido de Tipo II tenían una probabilidad significativamente mayor de recibir un resultado anómalo de la PPNI en comparación con las de Tipo I (12,6% frente a 1,7%; P<0,001). Entre los 655 gemelos desaparecidos, la PPNI fue indicativa de trisomías 21, 18 y 13 en 17 casos (tasa de cribado positivo [TCP], 2,60%), cuatro casos (TCP, 0,61%) y ocho casos (TCP, 1,22%), respectivamente. La PPNI fue indicativa de hallazgos adicionales (aberraciones cromosómicas distintas de las trisomías principales) en 29 casos que se sometieron a una PPNI de genoma completo (TCP, 6,16%). En 7/17 (41,2%) casos, la trisomía 21 se confirmó en el feto no desaparecido mediante seguimiento citogenético. La sensibilidad de la prueba PPNI para la detección de la trisomía 21 en embarazos de gemelo desaparecido fue del 100% (IC 95%, 59,0–100%), la especificidad fue del 98,5% (IC 95%, 97,2–99,3%) y el VPP fue del 41,2% (IC 95%, 18,4–67,1%). Ninguno de los casos de trisomía 18 (n=4), trisomía 13 (n=8) o con hallazgos adicionales (n=29) se confirmó en el feto no desaparecido. En ninguno de los 12 casos en los que la prueba PPNI se realizó después de las 15 semanas de gestación hubo resultados discordantes positivos. Se realizó la PPNI a 2992 mujeres con un embarazo de gemelos dicoriónico biamniótico, a 1112 mujeres con un embarazo de gemelos monocoriónico y a 75 mujeres con un embarazo de trillizos. De los 2992 embarazos de gemelos dicoriónicos, 27 resultados de la PPNI eran indicativos de trisomía 21, 18 o 13 (TCP, 0,90%), de los cuales 21 se confirmaron en un feto. Además, 16 resultados de la PPNI fueron indicativos de un hallazgo adicional (TCP, 0,75%), de los cuales tres se confirmaron mediante pruebas prenatales invasivas. En 3/1112 (0,3%) embarazos de gemelos monocoriónicos, la PPNI fue indicativa de trisomía 21, que se confirmó en ambos fetos en todos los casos. Además, la PPNI fue indicativa de un hallazgo adicional en cuatro casos (TCP, 0,49%), de los cuales no se confirmó ninguno. De los 75 embarazos de trillizos, la PPNI fue indicativa de trisomía 21 en un caso (TCP, 1,33%); la trisomía 21 se confirmó en uno de los tres fetos de trillizos. CONCLUSIONES: Las mujeres con un embarazo de gemelo desaparecido de Tipo II tienen más probabilidades de recibir un resultado anómalo de la PPNI en comparación con las que tienen un embarazo de gemelo desaparecido de Tipo I. La PPNI parece adecuada para detectar la trisomía 21 en el feto no desaparecido de un embarazo de gemelo desaparecido, mientras que ninguno de los hallazgos de trisomía 18, trisomía 13 o adicionales pudo confirmarse en el seguimiento citogenético. No se notificaron resultados discordantes positivos cuando la PPNI se realizó después de las 15 semanas de gestación.

无创产前检测在消失双胎及多胎妊娠中的表现:TRIDENT‐2研究结果 目的: 评估无创产前检测(NIPT)在消失双胎及多胎妊娠中的检测性能。 方法: 本研究作为TRIDENT‐2研究的一部分开展，该研究自2020年6月1日至2023年3月31日在荷兰为多胎妊娠或消失双胎妊娠的女性提供NIPT作为一线筛查检测。异常的NIPT结果通过后续侵入性产前检测和/或产后遗传学检测进行验证。绒毛膜性、羊膜性及消失双胎类型通过孕早期超声检查确定。若存在一个额外的空孕囊，则消失双胎被归类为I型；若超声观察到额外的非存活胚胎，则被归类为II型。评估了NIPT的检测性能(敏感性、特异性及阳性预测值)。 结果: 共有655名消失双胎妊娠女性接受了NIPT检测，其中I型231例，II型374例，类型未知50例。与I型消失双胎妊娠女性相比，II型女性获得异常NIPT结果的可能性显著更高(12.6%对比1.7%；P<0.001)。在这655例消失双胎中，NIPT分别提示17例(筛查阳性率2.60%)、4例(筛查阳性率0.61%)和8例(筛查阳性率1.22%)存在21三体、18三体和13三体。在接受全基因组NIPT检测的病例中，有29例(筛查阳性率6.16%)提示存在额外发现(即除主要三体以外的染色体畸变)。在17例提示21三体的病例中，有7例(41.2%)通过后续细胞遗传学检测确认了存活胎儿存在21三体。NIPT检测消失双胎妊娠中21三体的敏感性为100%(95%置信区间59.0–100%)，特异性为98.5%(95%置信区间97.2–99.3%)，阳性预测值为41.2%(95%置信区间18.4–67.1%)。所有提示18三体(4例)、13三体(8例)或额外发现(29例)的病例，均未在存活胎儿中得到确认。在妊娠15周后接受NIPT检测的12例病例中，未出现不一致阳性结果。此外，研究还对2992名双绒毛膜双羊膜囊双胎妊娠女性、1112名单绒毛膜双胎妊娠女性及75名三胎妊娠女性进行了NIPT检测。在2992例双绒毛膜双胎妊娠中，有27例NIPT结果提示21三体、18三体或13三体(筛查阳性率0.90%)，其中21例在其中一胎中得到确认。另有16例NIPT结果提示额外发现(筛查阳性率0.75%)，其中3例经侵入性产前检测确认。在1112例单绒毛膜双胎妊娠中，有3例(0.3%)NIPT提示21三体，所有病例均确认双胎均受累。另有4例(筛查阳性率0.49%)NIPT提示额外发现，但均未获确认。在75例三胎妊娠中，有1例(筛查阳性率1.33%)NIPT提示21三体，确认结果为三胎中一胎受累。 结论: 与I型消失双胎妊娠女性相比，II型消失双胎妊娠女性更可能获得异常的NIPT结果。NIPT似乎适用于检测消失双胎妊娠中存活胎儿的21三体，然而，所有提示的18三体、13三体或额外发现在细胞遗传学随访中均未得到确认。当NIPT在妊娠15周后进行时，未报告不一致阳性结果。.

Keywords: cell‐free DNA; multiple pregnancy; non‐invasive prenatal testing; prenatal screening; vanishing‐twin pregnancy.

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Figures

Figure 1
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Flowchart showing inclusion of pregnancies in study that underwent non‐invasive prenatal testing (NIPT). *Including two cases in which two chromosomal aberrations were detected. †Including one case in which two chromosomal aberrations were detected.
Figure 2
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Distribution of concordant (formula image) and discordant‐positive (formula image) non‐invasive prenatal testing (NIPT) results (a) and percentage of NIPT results that were discordant (b), per weekly interval between fetal demise and NIPT in vanishing‐twin pregnancies.
Figure 3
Figure 3
Distribution of concordant (formula image) and discordant‐positive (formula image) non‐invasive prenatal testing (NIPT) results per gestational week in vanishing‐twin pregnancies.
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References

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